期刊简介

               本刊是由广东医学院主办的综合性医学学术刊物(双月刊),国内外公开发行;是中国核心期刊(遴选)数据库、中国期刊全文数据库收录期刊,中国学术期刊综合评价数据库统计源期刊,广东省优秀科技期刊。                

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  • 杂志名称:广东医科大学学报杂志
  • 主管单位:广东省教育厅
  • 主办单位:广东医科大学
  • 国际刊号:1005-4057
  • 国内刊号:44-1731/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:广东省优秀科技期刊一等奖(第二届)期刊收录:知网收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏
广东医科大学学报杂志2015年第03期

靶向EBV阳性鼻咽癌小环质粒的构建及表达

左瑜芳;徐祖敏;廖思海;陈满瑜;陈国强;黄文林

关键词:小环载体, oriP启动子, 干扰素γ, 鼻咽癌, EB病毒
摘要:目的 构建表达人IFNγ的靶向小环质粒及其对照质粒,并观察其在EBV阳性鼻咽癌细胞中的靶向表达.方法 采用分子克隆的方法构建中间靶向质粒pSP72-oriP-IFNγ-polyA(pSP72-oriP-IFNγ)和对照质粒pSP72-CMV-IFNγ-polyA(pSP72-CMV-IFNγ).对其分别做双酶切,定向克隆于母环质粒p2ΦC31中,构建成p2ΦC31-oriP-IFNγ和p2ΦC31-CMV-IFNγ质粒.转化TOP10细菌后,通过介导分子内重组,降解原核骨架,获取只含目的基因表达盒的靶向小环质粒mc-oriP-IFNγ和对照质粒mc-CMV-IFNγ.将小环质粒分别转染EBV阴性细胞和EBV阳性细胞,采用ELISA方法定量检测小环质粒介导目的基因的靶向表达.结果 构建了靶向性母环质粒p2ΦC31-oriP-IFNγ及其对照质粒p2ΦC31-CMV-IFNγ,并诱导纯化出相应的靶向性小环质粒mc-oriP-IFNγ及其对照质粒mc-CMV-IFNγ,通过转染真核细胞,检测出靶向性小环质粒能够介导IFNγ在EBV阳性鼻咽癌细胞中特异表达.结论 成功构建了靶向性小环质粒mc-oriP-IFNγ,并证明其能够特异性地介导目的基因在EBV阳性鼻咽癌细胞中表达,而在EBV阴性鼻咽癌细胞及正常细胞中不表达.