期刊简介
本刊是由广东医学院主办的综合性医学学术刊物（双月刊），国内外公开发行；是中国核心期刊(遴选)数据库、中国期刊全文数据库收录期刊，中国学术期刊综合评价数据库统计源期刊，广东省优秀科技期刊。
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首页>广东医科大学学报杂志
- 杂志名称：广东医科大学学报杂志
- 主管单位：广东省教育厅
- 主办单位：广东医科大学
- 国际刊号：1005-4057
- 国内刊号：44-1731/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：广东省优秀科技期刊一等奖（第二届）期刊收录：知网收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏
重组人磷脂酰肌醇3-激酶p110β催化亚基的原核表达
刘文；梁念慈
关键词：磷脂酰肌醇3-激酶, 原核表达
摘要：目的:表达人磷脂酰肌醇3-激酶 p110 β催化亚基.方法:将构建有人磷脂酰肌醇3 -激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI 3-K)p110 β催化亚基cDNA的重组质粒,转化大肠杆菌BL 21(DE3),用IPTG进行诱导表达.用磷脂酰肌醇-4、5-二磷酸、[γ-32P]ATP与重组PI 3-K p110 β催化亚基一起保温的方法测定PI 3-K的活性;32P标记的磷脂用氯仿和甲醇抽提、板薄层层析和放射自显影来分析.结果:SDS-PAGE显示表达出一110 kD的新蛋白质分子,重组蛋白占菌体总蛋白的比例为15%,大多数重组蛋白以可溶性形式存在.wortmannin是PI 3-K特异的抑制剂,wortmannin对重组PI 3-K p110 β亚基有抑制作用,这种抑制作用呈剂量依赖关系(2.5～20 nmo1/L).结论:重组蛋白是有活性的人PI 3-K p110 β催化亚基.
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