期刊简介
本刊是由广东医学院主办的综合性医学学术刊物（双月刊），国内外公开发行；是中国核心期刊(遴选)数据库、中国期刊全文数据库收录期刊，中国学术期刊综合评价数据库统计源期刊，广东省优秀科技期刊。
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首页>广东医科大学学报杂志
- 杂志名称：广东医科大学学报杂志
- 主管单位：广东省教育厅
- 主办单位：广东医科大学
- 国际刊号：1005-4057
- 国内刊号：44-1731/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：广东省优秀科技期刊一等奖（第二届）期刊收录：知网收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏
小鼠蛋白激酶CK2β亚基cDNA的克隆与序列分析
刘新光；彭海艳；陈小文；郑克勤；梁念慈
关键词：β调节亚基/蛋白激酶CK2/小鼠, 表达载体pT7-7, 分子克隆, DNA序列分析
摘要：目的:构建小鼠蛋白激酶CK2 β亚基cDNA重组表达质粒,以便深入进行CK2结构与功能的研究.方法:通过反转录PCR从NIH3T3 小鼠成纤维细胞中获得小鼠蛋白激酶CK2 β亚基编码区cDNA,PCR扩增酶为高保真DNA聚合酶.将Nde I/HindⅢ彻底双酶切PCR产物定向连接到牛小肠碱性磷酸酶去5′端磷酸的同样彻底Nde I/HindⅢ双酶切的表达载体pT7-7中,转化感受态大肠杆菌DH5α获得转化子,用0.8%琼脂糖凝胶电泳初步筛选转化子,将阳性克隆进行单和双酶切分析鉴定.随机挑选两个阳性克隆进行DNA测序.结果:转化子的阳性筛选率为100%,限制性酶切分析结果表明插入片段和重组质粒的大小与理论推测值相符.DNA测序结果表明:两个重组小鼠CK2 β亚基克隆中的插入片段序列均与两种已报道的小鼠 CK2 β亚基 cDNA编码区序列分别存在一个碱基差异,但我们报道的这2个差异碱基与大鼠、兔、猪和人CK2 β亚基cDNA的编码区相应碱基序列一致.结论:本实验克隆的小鼠蛋白激酶CK2 β亚基cDNA编码区序列可能是正确的序列.
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