期刊简介

               本刊是由广东医学院主办的综合性医学学术刊物(双月刊),国内外公开发行;是中国核心期刊(遴选)数据库、中国期刊全文数据库收录期刊,中国学术期刊综合评价数据库统计源期刊,广东省优秀科技期刊。                

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  • 杂志名称:广东医科大学学报杂志
  • 主管单位:广东省教育厅
  • 主办单位:广东医科大学
  • 国际刊号:1005-4057
  • 国内刊号:44-1731/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:广东省优秀科技期刊一等奖(第二届)期刊收录:知网收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏
广东医科大学学报杂志2001年第01期

人干细胞因子(SCF)5’旁侧调控序列与其全长cDNA融合克隆的构建及鉴定

谭运年;谭文斌;彭兴华

关键词:人干细胞因子, 调控序列, cDNA, 融合克隆
摘要:目的:为研究人干细胞因子(SCF)5’旁侧1.42 kb区域内不同序列对全长cDNA在真核细胞中表达的调控作用,构建了SCF5’旁侧1.42 kb的调控序列与其1.2 kb的全长cDNA融合克隆。方法:将PCR获得的SCF5’旁侧1.42 kb的调控序列与RT-PCR获得的其1.2 kb的全长cDNA克隆入pGEM-T载体,筛选正确插入方向,利用合适的限制性内切酶从中切出三个片段依次亚克隆入pUC19克隆载体中。结果:获得了SCF5’旁侧 1.42 kb的调控序列与其1.2 kb的全长cDNA并成功地构建了它们的融合克隆。结论:T-载体在克隆添加了少量具有3’→5’外切核酸酶的PCR产物中仍然有效;在稍大片段的基因克隆操作中,利用分段亚克隆的方法,避开干扰另外的酶切位点,依次分段亚克隆更为可行。